محمد نبیونی، عبدالحسین شیروی،
دوره 12، شماره 3 - ( 8-1391 )
چکیده
بند ناف از مهمترین منابع سلولهای بنیادی مزانشیمی است. این سلولها در صورتی که تحت شرایط خاص قرار گیرند، توان تمایز به بافتهای مختلف را دارند. در پژوهشهای گذشته اثر تمایزی ویتامین D3 بر روی سلولهای بنیادی استخوان اثبات شده است. همچنین نشان داده شده است که زهر زنبور (BV) سبب تمایز سلولهای سرطانی میگردد. در بررسی حاضر اثر تمایزی BV و ویتامین D3 بر روی سلولهای بنیادی بند ناف استئوبلاست بررسی شد. برای انجام این تحقیق بافتهای بندناف حاصل از 12-10 جنین موش پس از هضم آنزیمی در محیط DMEM کشت داده شدند. برای اثبات بنیادی بودن این سلولها فاکتور OCT4 جنینی و برای اثبات مزانشیمی بودن آنها حضور مارکرهای سطحی CD29، CD44 و CD73 بهروش فلوسیتومتری بررسی شد. نتایج بیان بالای فاکتورهای فوق را در این سلولها نشان داد. پس از پاساژ دوم، برای بررسی تمایز، سلولها با غلظتهای مختلف BV، ویتامین D3 و هم افزایی این دو ترکیب بهمدت 21 روز تیمار شدند. در ابتدا برای بهدست آوردن دوزهای مناسب BV، اثرات کشندگی آن بر سلولها با روش MTTبررسی شد و مشخص شد که BV در غلضتهای بیشتر از &mug/ml6 موجب مهار رشد سلولهای مزانشیمی میگردد. سپس سطح کلسیم سلولها توسط رنگآمیزی آلیزارینرد بررسی شد. علاوه بر این میزان آلکالین فسفاتاز بهعنوان یک مارکر استخوانی اندازهگیری شد. با استفاده از رنگآمیزی آلیزارینرد و تست آلکالین فسفاتاز اثبات شد که BV با غلظتهای غیرسمی (&mug/ml2 ،&mug/ml4و &mug/ml6) موجب تمایز اندکی در سلولهای بنیادی بند ناف به سمت استخوان موجب میشود. در صورتی که استفاده توأم BV با ویتامین D3 موجب افزایش قدرت تمایزی این ویتامین میگردد. در نتیجه، پیشنهاد میشود سلولهای بنیادی بند ناف در صورتی که تحت تیمار همزمانBV و ویتامین D3 قرار بگیرند توانایی تمایز به سمت سلولهای استخوان ساز را داشته و در نتیجه میتوانند در سلول درمانی کاربرد داشته باشند