fa بررسی اثرات زهر زنبورعسل و ویتامین D3 بر سلول‌های بنیادی مزانشیمی بندناف و تمایز به سمت استئوبلاست علمی پژوهشی بنیادی S بند ناف از مهم‌ترین منابع سلول­های بنیادی مزانشیمی است. این سلول­ها در صورتی که تحت شرایط خاص قرار گیرند، توان تمایز به بافت­های مختلف را دارند. در پژوهش‌های گذشته اثر تمایزی ویتامین D3 بر روی سلول‌های بنیادی استخوان اثبات شده است. هم‌چنین نشان داده شده است که زهر زنبور (BV) سبب تمایز سلول­های سرطانی می­گردد. در بررسی حاضر اثر تمایزی BV و ویتامین D3‌ بر روی سلول­های بنیادی بند ناف استئوبلاست بررسی شد. برای انجام این تحقیق بافت‌های بند­ناف حاصل از 12-10 جنین موش پس از هضم آنزیمی در محیط DMEM‌ کشت داده شدند. برای اثبات بنیادی بودن این سلول­ها فاکتور OCT4 جنینی و برای اثبات مزانشیمی بودن آن‌ها حضور مارکرهای سطحی CD29، CD44 و CD73 به‌روش فلوسیتومتری بررسی شد. نتایج بیان بالای فاکتور‌های فوق را در این سلول­ها نشان داد. پس از پاساژ دوم، برای بررسی تمایز، سلول­ها با غلظت­های مختلف BV، ویتامین D3 و هم افزایی این دو ترکیب به‌مدت 21 روز تیمار شدند. در ابتدا برای به‌دست آوردن دوز­های مناسب BV، اثرات کشندگی آن بر سلول­ها با روش  MTT‌بررسی شد و مشخص شد که BV در غلضت­های بیش‌تر از &mug/ml6 موجب مهار رشد سلول‌های مزانشیمی می­گردد. سپس سطح کلسیم سلول­ها توسط رنگ­آمیزی آلیزارین‌رد بررسی شد. علاوه بر این میزان آلکالین فسفاتاز به‌عنوان یک مارکر استخوانی اندازه‌گیری شد. با استفاده از رنگ­آمیزی آلیزارین­رد و تست آلکالین فسفاتاز اثبات شد که BV با غلظت­های غیرسمی (&mug/ml2 ،&mug/ml4و &mug/ml6) موجب تمایز اندکی در سلول­های بنیادی بند ناف به سمت استخوان موجب می­شود. در صورتی که استفاده توأم BV با ویتامین D3 موجب افزایش قدرت تمایزی این ویتامین می­گردد. در نتیجه، پیشنهاد می­شود سلول­های بنیادی بند ناف در صورتی که تحت تیمار هم‌زمانBV  و ‌ویتامین D3 قرار بگیرند توانایی تمایز به سمت سلول­های استخوان ساز را داشته و در نتیجه می­توانند در سلول درمانی کاربرد داشته باشند Umbilical cord (UC) is an important source of multipotential mesenchymal stem cells (MSCs). MSCs can be differentiated into different types of cells if they cultured under specific conditions. It has been proved that vitamin D3 can cause differentiation of stem cells in to osteoblast. Also, it has been observed that bee venom (BV) is effective in differentiation of cancerous cells. In this study differentiating potential of BV and vitamin D3 on MSCs to osteoblast was examined. Furthermore, our hypothesis was that BV could increase differentiating potential of vitamin D3. The cells obtained from UC tissues of 10-12 mouse embryos which were digested enzymatically and suspended in DMEM medium. For approving of stem cells, embryonic Oct4 marker was checked and the mesenchymal character of these cells was proven by surface markers including CD73, CD29, CD44. The flowcytometric analysis revealed high levels of these markers. After the second passage, in order to induce osteogenic differentiation, cells were cultured for 21days in DMEM medium containing different concentrations of BV, vitamin D3 separately and BV/vitamin D3 together. At first, cytotoxic effects of BV on MSCs were tested by MTT assay, which were shown that BV inhibited MSCs growth at higher concentrations than 6&mug/ml. Following the treatment, calcium’s level in the cells was determined by Alizarin red staining. Also, as an osteogenic marker, alkalin phosphatase level was measured in treated and non-treated cells. By Alizarin red staining and alkalin phosphatase assay, we found that BV With non-toxic concentrations (2µgr/ml, 4µgr/ml and 6µgr/ml) can cause a few osteogenic differentiation of MSCs. Whereas, usage of BV/vitamin D3 together, caused increasing the differential effects of vitamin D3. In conclusion we suggest that if MSCs were treated with bee venom and vitamin 3 at the same time, these components able to differentiate MSCs to osteoblast, therefore, they could be useful in cell therapy. سلول های بنیادی مزانشیمی , زهر زنبور عسل , ویتامین D3 , استئوبلاست , Mesenchymal stem cells , Bee venom , Vitamin D3 , Osteoblast , 569 580 http://jsci.khu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-160-28&slc_lang=fa&sid=1 محمد نبیونی nabiuni@tmu.ac.ir 1003194753284600378 1003194753284600378 No دانشگاه خوارزمی عبدالحسین شیروی jegjeo1382@gmail.com 1003194753284600379 1003194753284600379 No دانشگاه آزاد اسلامی واحد دامغان